E faʻapefea ona fuafua le faʻatonuga sili ona lelei?
Mo le inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), o le maualuga o le faʻatonuga, o le sili atu lea.O le fa'atonuga sili ona lelei e fa'alagolago i tulaga fa'ata'ita'i fa'apitoa ma le mana'omia o le induction effect.
E masani lava, o le faʻaogaina o le IPTG e faʻaaogaina i le va o le 0.1-1 mM.E mafai ona fa'aitiitia a'afiaga i le tuputupu a'e o sela ma fa'aititia le cytotoxicity ona o le fa'aalia o polotini fa'atatau.Ole maualuga maualuga e mafai ona mafua ai le tele o le mamafa o le metabolism, e afaina ai le tuputupu ae o le sela ma le faʻaalia lelei.
O le auala e fuafua ai le faʻatonuga sili ona lelei e mafai ona suʻesuʻeina le maualuga o le faʻaaliga o le porotini sini e ala i le faʻatinoina o suʻega o le IPTG i faʻasalalauga eseese.E mafai ona faia su'ega fa'aleaganu'u la'ititi e fa'aaoga ai le tele o fa'aputuga IPTG (fa'ata'ita'iga 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ma isi) ma o le fa'aaliga fa'aalia i fa'asalalauga eseese e mafai ona iloiloina e ala i le su'eina o le maualuga o le fa'aaliga o le porotini sini (fa'ata'ita'iga i Sisifo. blot po'o le su'esu'eina o le fluorescence).E tusa ai ma faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga, o le faʻatonuga ma le faʻaaliga sili ona lelei na filifilia e avea ma faʻatonuga sili ona lelei.
E le gata i lea, e mafai foi ona e vaʻai i tusitusiga talafeagai poʻo le poto masani o isi fale suʻesuʻe e malamalama ai i le faʻaogaina masani o le IPTG faʻaogaina tulaga i lalo o tulaga faʻataʻitaʻi tutusa, ona faʻaogaina lea ma fetuunai e tusa ai ma manaʻoga faʻataʻitaʻi.
E taua le maitauina o le fa'atonuga sili ona lelei e mafai ona fesuisuia'i e fa'atatau i faiga fa'aaliga eseese, polotini fa'atatau, ma tulaga fa'ata'ita'i, o lea e sili ai le fa'asili i luga o le fa'avae i lea tulaga.
Taimi meli: Sep-28-2023