O le Dithiothreitol (DTT) o se mea e masani ona faʻaaogaina faʻaititia, faʻapitoa foi o le faʻaopoopoga lanu meamata fou.O se fa'aputu fa'aola mole mole la'ititi e lua vaega mercaptan (-SH).Ona o lona faʻaitiitia o mea totino ma le mautu, DTT e faʻaaogaina lautele i suʻesuʻega o le biochemistry ma le molecular biology.
O le matafaioi autu a le DTT o le faʻaitiitia o fusi o le disulfide i polotini ma isi biomolecules.O le fusi o le disulfide o se vaega taua o le gaugau ma le mautu o le polotini, ae i lalo o nisi tulaga faʻataʻitaʻiga, e pei o le faʻaitiitia o le SDS-PAGE suʻesuʻega, toe faʻaleleia o le protein ma le gaugau, e tatau ona faʻaitiitia le fusi o le disulfide i vaega e lua e faʻaalia ai le fausaga faʻafanua o le polotini.E mafai e le DTT ona tali atu i fusi o le disulfide e faʻaititia ai i latou i vaega mercaptan, ma tatala ai le fausaga faʻapitoa o le porotini ma faʻafaigofie ona faʻavasega ma faʻaogaina.
E mafai fo'i ona fa'aoga le DTT e puipuia ai le gaioiga ole enzyme ma le mautu.I nisi o gaioiga e fa'aosoina e le enzyme, e mafai ona fa'aitiitia le gaioiga a le enzyme e le fa'ama'i.E mafai e le DTT ona tali atu i vailaʻau faʻamaʻi e faʻaitiitia ai i mea e le afaina, ma puipuia ai le gaioiga ma le mautu o le enzyme.
Pe a faʻatusatusa i faʻamaʻi faʻaitiitiga masani e pei o le β-mercaptoethanol (β-ME), o le DTT e manatu o se mea e sili atu le saogalemu ma sili atu ona mautu.E le gata ina mautu i vaifofo vai, ae fa'atumauina fo'i ona fa'aitiitiga meatotino i lalo o le maualuga o le vevela ma tulaga fa'avae o le acid.
O le faʻaogaina o le DTT e faigofie lava.I se tulaga lautele, DTT e faʻamavaeina i totonu o se paʻu talafeagai ona faʻaopoopo lea i le faiga faʻataʻitaʻi.Ole faʻatonuga sili ona lelei ole DTT e manaʻomia ona fuafua e tusa ai ma le faʻataʻitaʻiga faʻapitoa, ma e masani ona faʻaaogaina ile va ole 0.1-1mM.E mafai ona fa'aitiitia a'afiaga i le tuputupu a'e o sela ma fa'aititia le cytotoxicity ona o le fa'aalia o polotini fa'atatau.Ole maualuga maualuga e mafai ona mafua ai le tele o le mamafa o le metabolism, e afaina ai le tuputupu ae o le sela ma le faʻaalia lelei.
O le auala e fuafua ai le faʻatonuga sili ona lelei e mafai ona suʻesuʻeina le maualuga o le faʻaaliga o le porotini sini e ala i le faʻatinoina o suʻega o le IPTG i faʻasalalauga eseese.E mafai ona faia su'ega fa'aleaganu'u la'ititi e fa'aaoga ai le tele o fa'aputuga IPTG (fa'ata'ita'iga 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ma isi) ma o le fa'aaliga fa'aalia i fa'asalalauga eseese e mafai ona iloiloina e ala i le su'eina o le maualuga o le fa'aaliga o le porotini sini (fa'ata'ita'iga i Sisifo. blot po'o le su'esu'eina o le fluorescence).E tusa ai ma faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga, o le faʻatonuga ma le faʻaaliga sili ona lelei na filifilia e avea ma faʻatonuga sili ona lelei.
E le gata i lea, e mafai foi ona e vaʻai i tusitusiga talafeagai poʻo le poto masani o isi fale suʻesuʻe e malamalama ai i le faʻaogaina masani o le IPTG faʻaogaina tulaga i lalo o tulaga faʻataʻitaʻi tutusa, ona faʻaogaina lea ma fetuunai e tusa ai ma manaʻoga faʻataʻitaʻi.
E taua le maitauina o le fa'atonuga sili ona lelei e mafai ona fesuisuia'i e fa'atatau i faiga fa'aaliga eseese, polotini fa'atatau, ma tulaga fa'ata'ita'i, o lea e sili ai le fa'asili i luga o le fa'avae i lea tulaga.
I le aotelega, o le DTT o se faʻaaogaina faʻaitiitiga masani lea e mafai ona faʻaaogaina e faʻaitiitia ai fusi o le disulfide i polotini ma isi biomolecules ma puipuia le gaioiga o le enzyme ma le mautu.Ua fa'aaogaina lautele i su'esu'ega o le biochemistry ma le molecular biology.
Taimi meli: Sep-28-2023