O le Dithiothreitol (DTT) o se vailaʻau faʻaitiitia e masani ona faʻaaogaina, e taʻua foʻi o le faʻaopoopoga lanumeamata fou. O se vaega faʻaola molekiu laʻititi e lua vaega mercaptan (-SH). Ona o ona uiga faʻaitiitia ma le mautu, e faʻaaogaina lautele le DTT i suʻesuʻega o le biochemistry ma le biology molekiu.
O le matafaioi autū a le DTT o le faʻaitiitia lea o fusi disulfide i porotini ma isi biomolecules. O le fusi disulfide o se vaega tāua o le gaugau ma le mautu o porotini, ae i lalo o nisi o tulaga faʻataʻitaʻi, e pei o le suʻesuʻega SDS-PAGE e mafai ona faʻaitiitia, toe faʻafouina o porotini ma le gaugau, e tatau ona faʻaitiitia le fusi disulfide i ni vaega thiol se lua e tatala ai le fausaga faʻapitoa o le porotini. E mafai e le DTT ona tali atu i fusi disulfide e faʻaitiitia ai i ni vaega mercaptan, ma tatala ai le fausaga faʻapitoa o le porotini ma faʻafaigofie ai ona suʻesuʻeina ma faʻaaogaina.
E mafai fo'i ona fa'aaogaina le DTT e puipuia ai le gaioiga ma le mautu o le enzyme. I nisi o tali e fa'agaoioia e le enzyme, e ono fa'aitiitia le gaioiga o le enzyme e le oxidant. E mafai e le DTT ona tali atu ma oxidants e fa'aitiitia ai i latou i ni mea e le afaina, ma puipuia ai le gaioiga ma le mautu o le enzyme.
Pe a faatusatusa i vailaau fa'aitiitia masani e pei o le β-mercaptoethanol (β-ME), ua manatu le DTT o se vailaau fa'aitiitia e sili atu le saogalemu ma le mautu. E le gata ina mautu i totonu o vai, ae faatumauina foi ona uiga fa'aitiitia i lalo o le vevela maualuga ma tulaga o le acid-base.
E faigofie lava le faʻaaogaina o le DTT. I se tulaga lautele, e faʻafefiloi le DTT i totonu o se buffer talafeagai ona faʻaopoopo lea i le faiga faʻataʻitaʻi. E manaʻomia ona fuafuaina le maualuga sili ona lelei o le DTT e tusa ai ma le faʻataʻitaʻiga patino, ma e masani ona faʻaaogaina i le va o le 0.1-1mM. O le maualalo o le maualuga e mafai ona faʻaitiitia ai aʻafiaga leaga i le tuputupu aʻe o sela ma e mafai ona faʻaitiitia ai le cytotoxicity ona o le soona faʻaalia o porotini faʻatatau. O le maualuga o le maualuga e mafai ona mafua ai le tele o le avega o le metabolism o sela, e aʻafia ai le tuputupu aʻe o sela ma le lelei o le faʻaalia.
O le auala e fuafua ai le maualuga sili ona lelei o le faʻaaogaina o le porotini faʻamoemoeina e ala i le faia o suʻega faʻaosofia IPTG i tulaga eseese. E mafai ona faia suʻega faʻatoʻaga laiti e faʻaaoga ai le tele o tulaga IPTG (e pei o le 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ma isi) ma o le aafiaga o le faʻaaogaina o le vaega eseese e mafai ona iloiloina e ala i le iloa o le maualuga o le faʻaaogaina o le porotini faʻamoemoeina (e pei o le Western blot poʻo le fluorescence detection). E tusa ai ma taunuuga o suʻega, o le tulaga sili ona lelei e iai le aafiaga o le faʻaaogaina o le vaega sili ona lelei na filifilia o le tulaga sili ona lelei.
E le gata i lea, e mafai foi ona e faasino i tusitusiga talafeagai po o le poto masani o isi fale suesue e malamalama ai i le tele o le malosi o le IPTG e masani ona faaaogaina i lalo o tulaga faataitai tutusa, ona faaleleia lea ma fetuunai e tusa ai ma manaoga faataitai.
E tāua le mātauina o le malosi sili ona lelei e ono fesuisuiaʻi e fuafua i faiga eseese o le faʻaalia, porotini faʻatatau, ma tulaga faʻataʻitaʻi, o lea e sili ai le faʻaleleia atili i lea mataupu ma lea mataupu.
I se aotelega, o le DTT o se mea e masani ona faʻaaogaina e faʻaitiitia ai fusi disulfide i totonu o porotini ma isi biomolecules ma puipuia ai le gaioiga ma le mautu o le enzyme. Ua faʻaaogaina lautele i suʻesuʻega o le biochemistry ma le molecular biology.
Taimi na lafoina ai: Setema-28-2023